Вісцаральны лейшманіёз (ВЛ), вядомы як кала-азар на Індыйскім субкантыненце, — гэта паразітарнае захворванне, выкліканае жгуцікападобным найпростым Leishmania, якое можа быць смяротным, калі яго не лячыць своечасова. Москаля Phlebotomus argentipes з'яўляецца адзіным пацверджаным пераносчыкам ВЛ у Паўднёва-Усходняй Азіі, дзе з ім змагаюцца з дапамогай рэшткавага апырсквання ў памяшканнях (IRS), сінтэтычнага інсектыцыду. Выкарыстанне ДДТ у праграмах барацьбы з ВЛ прывяло да развіцця рэзістэнтнасці ў москалятак, таму ДДТ быў заменены інсектыцыдам альфа-цыперметрынам. Аднак альфа-цыперметрын дзейнічае падобна ДДТ, таму рызыка развіцця рэзістэнтнасці ў москалятак павялічваецца пры стрэсе, выкліканым паўторным уздзеяннем гэтага інсектыцыду. У гэтым даследаванні мы ацанілі ўспрымальнасць дзікіх камароў і іх нашчадкаў F1 з дапамогай біялагічнага аналізу CDC у бутэльках.
Мы сабралі камароў з 10 вёсак у акрузе Музафарпур штата Біхар, Індыя. Восем вёсак працягвалі выкарыстоўваць высокапатэнцыйныя прэпараты.цыперметрынДля апырсквання ў памяшканнях адна вёска спыніла выкарыстанне высокаканцэнтраванага цыперметрыну, а адна вёска ніколі не выкарыстоўвала высокаканцэнтраваны цыперметрын для апырсквання ў памяшканнях. Сабраныя камары падвяргаліся ўздзеянню загадзя вызначанай дыягнастычнай дозы на працягу пэўнага часу (3 мкг/мл на працягу 40 хвілін), і праз 24 гадзіны пасля ўздзеяння фіксаваліся ўзровень знішчэння і смяротнасць.
Узровень гібелі дзікіх камароў вагаўся ад 91,19% да 99,47%, а іх пакалення F1 — ад 91,70% да 98,89%. Праз дваццаць чатыры гадзіны пасля ўздзеяння смяротнасць дзікіх камароў вагалася ад 89,34% да 98,93%, а іх пакалення F1 — ад 90,16% да 98,33%.
Вынікі гэтага даследавання паказваюць, што ў P. argentipes можа развіцца рэзістэнтнасць, што сведчыць аб неабходнасці пастаяннага маніторынгу і пільнасці для падтрымання кантролю пасля дасягнення ліквідацыі.
Вісцаральны лейшманіёз (ВЛ), вядомы як кала-азар на Індыйскім субкантыненце, — гэта паразітарнае захворванне, якое выклікаецца жгуцікападобным найпростым Leishmania і перадаецца праз укус заражаных самак пясчаных мух (Diptera: Myrmecophaga). Пясчаныя мухі з'яўляюцца адзіным пацверджаным пераносчыкам ВЛ у Паўднёва-Усходняй Азіі. Індыя блізкая да дасягнення мэты ліквідацыі ВЛ. Аднак, каб падтрымліваць нізкі ўзровень захворвання пасля яго ліквідацыі, вельмі важна скараціць папуляцыю пераносчыка, каб прадухіліць патэнцыйную перадачу.
Барацьба з камарамі ў Паўднёва-Усходняй Азіі ажыццяўляецца шляхам апырсквання рэшткамі інсектыцыдаў у памяшканнях (IRS) з выкарыстаннем сінтэтычных інсектыцыдаў. Скрытны характар спакою сярэбраніка робіць яго прыдатнай мішэнню для барацьбы з інсектыцыдамі шляхам апырсквання рэшткамі інсектыцыдаў у памяшканнях [1]. Апырскванне рэшткамі інсектыцыдаў дыхлардыфенілтрыхларэтану (ДДТ) у памяшканнях у рамках Нацыянальнай праграмы барацьбы з малярыяй у Індыі мела значны пабочны эфект у кантролі папуляцый камароў і значнаму зніжэнню колькасці выпадкаў малярыйнай хваробы [2]. Гэты незапланаваны кантроль малярыйнай хваробы падштурхнуў Індыйскую праграму ліквідацыі малярыйнай хваробы прыняць апырскванне рэшткамі інсектыцыдаў у памяшканнях у якасці асноўнага метаду барацьбы з сярэбранікай. У 2005 годзе ўрады Індыі, Бангладэш і Непала падпісалі мемарандум аб узаемаразуменні з мэтай ліквідацыі малярыйнай хваробы да 2015 года [3]. Намаганні па ліквідацыі, якія ўключаюць спалучэнне барацьбы з пераносчыкамі інфекцый і хуткай дыягностыкі і лячэння выпадкаў захворвання ў людзей, былі накіраваны на ўступленне ў фазу кансалідацыі да 2015 года, мэта, якая пазней была перагледжана да 2017 года, а затым да 2020 года. [4] Новая глабальная дарожная карта па ліквідацыі забытых трапічных хвароб уключае ліквідацыю малярыйнай хваробы да 2030 года. [5]
Паколькі Індыя ўступае ў пост-эрадыкацыйную фазу BCVD, вельмі важна пераканацца, што значная ўстойлівасць да бэта-цыперметрыну не развілася. Прычына ўстойлівасці заключаецца ў тым, што і ДДТ, і цыперметрын маюць аднолькавы механізм дзеяння, а менавіта яны накіраваны на бялок VGSC [21]. Такім чынам, рызыка развіцця ўстойлівасці ў пясчаных мух можа павялічвацца з-за стрэсу, выкліканага рэгулярным уздзеяннем высокамагутнага цыперметрыну. Таму вельмі важна кантраляваць і вызначаць патэнцыйныя папуляцыі пясчаных мух, устойлівыя да гэтага інсектыцыду. У гэтым кантэксце мэтай гэтага даследавання было кантраляваць стан успрымальнасці дзікіх пясчаных мух з выкарыстаннем дыягнастычных доз і працягласці ўздзеяння, вызначаных Чаўбі і інш. [20], якія вывучалі P. argentipes з розных вёсак у раёне Музафарпур у штаце Біхар, Індыя, у якіх бесперапынна выкарыстоўваліся сістэмы апырсквання ў памяшканнях, апрацаваныя цыперметрынам (вескі з бесперапынным IPS). Стан успрымальнасці дзікарослых відаў P. argentipes з вёсак, якія спынілі выкарыстанне сістэм апырсквання памяшканняў, апрацаваных цыперметрынам (былыя вёскі IPS), і тых, якія ніколі не выкарыстоўвалі сістэмы апырсквання памяшканняў, апрацаваныя цыперметрынам (вёскі без IPS), параўноўвалі з дапамогай біялагічнага аналізу CDC у бутэльках.
Для даследавання было адабрана дзесяць вёсак (мал. 1; табліца 1), з якіх восем мелі гісторыю пастаяннага распылення сінтэтычных пірэтроідаў (гіперметрыну; пазначаныя як вёскі з бесперапынным гіперметрынам) і мелі выпадкі віруснай інфекцыі (прынамсі адзін выпадак) за апошнія 3 гады. З астатніх двух вёсак у даследаванні адна вёска, якая не ўжывала распыленне бэта-цыперметрыну ў памяшканнях (вёска без распылення ў памяшканнях), была абрана ў якасці кантрольнай вёскі, а другая вёска, дзе ўжывалася перыядычнае распыленне бэта-цыперметрыну ў памяшканнях (вёска з перыядычным распыленнем у памяшканнях/былая вёска з распыленнем у памяшканнях), была абрана ў якасці кантрольнай вёскі. Выбар гэтых вёсак быў заснаваны на каардынацыі з Дэпартаментам аховы здароўя і Камандай па распыленні ў памяшканнях, а таксама на праверцы мікраплана дзеянняў па распыленні ў памяшканнях у акрузе Музафарпур.
Геаграфічная карта раёна Музафарпур з пазначэннем размяшчэння вёсак, уключаных у даследаванне (1–10). Месцы даследавання: 1, Маніфулкаха; 2, Рамдас Маджхаўлі; 3, Мадхубані; 4, Анандпур Харуні; 5, Пандэй; 6, Хірапур; 7, Мадхопур Хазары; 8, Хамідпур; 9, Нунфара; 10, Сімара. Карта была падрыхтавана з выкарыстаннем праграмнага забеспячэння QGIS (версія 3.30.3) і Open Assessment Shapefile.
Бутылкі для эксперыментаў па ўздзеянні былі падрыхтаваны ў адпаведнасці з метадамі Шаўбі і інш. [20] і Дэнлінгера і інш. [22]. Карацей кажучы, шкляныя бутэлькі аб'ёмам 500 мл былі падрыхтаваны за дзень да эксперыменту, а ўнутраная сценка бутэлек была пакрыта паказаным інсектыцыдам (дыягнастычная доза α-цыперметрыну складала 3 мкг/мл) шляхам нанясення ацэтонавага раствора інсектыцыду (2,0 мл) на дно, сценкі і вечка бутэлек. Затым кожную бутэльку сушылі на механічным валку на працягу 30 хвілін. На працягу гэтага часу павольна адкручвалі вечка, каб ацэтон выпарыўся. Пасля 30 хвілін сушкі здымалі вечка і паварочвалі бутэльку, пакуль увесь ацэтон не выпарыцца. Затым бутэлькі пакідалі адкрытымі для сушкі на ноч. Для кожнага паўторнага тэсту адна бутэлька, якая выкарыстоўвалася ў якасці кантролю, была пакрыта 2,0 мл ацэтону. Усе бутэлькі паўторна выкарыстоўваліся на працягу эксперыментаў пасля адпаведнай ачысткі ў адпаведнасці з працэдурай, апісанай Дэнлінгерам і інш. і Сусветнай арганізацыяй аховы здароўя [22, 23].
На наступны дзень пасля падрыхтоўкі інсектыцыду 30-40 дзіка злоўленых камароў (галодных самак) былі выняты з клетак у флаконах і акуратна ўдзіманы ў кожны флакон. На кожную бутэльку, пакрытую інсектыцыдам, выкарыстоўвалася прыблізна аднолькавая колькасць мух. Паўтарыце гэта не менш за пяць-шэсць разоў у кожнай вёсцы. Пасля 40 хвілін уздзеяння інсектыцыду фіксавалася колькасць збітых мух. Усіх мух адлоўлівалі механічным аспіратарам, змяшчалі ў кардонныя кантэйнеры аб'ёмам у пінту, пакрытыя дробнай сеткай, і змяшчалі ў асобны інкубатар пры тых жа ўмовах вільготнасці і тэмпературы з той жа крыніцай ежы (ватовыя дыскі, прасякнутыя 30% растворам цукру), што і неапрацаваныя калоніі. Смяротнасць фіксавалася праз 24 гадзіны пасля ўздзеяння інсектыцыду. Усіх камароў прэпаравалі і даследавалі для пацверджання відавай ідэнтычнасці. Такая ж працэдура была праведзена з нашчадкамі мух F1. Паказчыкі збіцця і смяротнасці фіксаваліся праз 24 гадзіны пасля ўздзеяння. Калі смяротнасць у кантрольных флаконах была <5%, карэкцыя на смяротнасць у паўторах не рабілася. Калі смяротнасць у кантрольнай групе складала ≥ 5% і ≤ 20%, смяротнасць у тэставых групах гэтай паўторы карэктавалі па формуле Эбата. Калі смяротнасць у кантрольнай групе перавышала 20%, усю тэставую групу выкідвалі [24, 25, 26].
Сярэдняя смяротнасць камароў P. argentipes, злоўленых у дзікай прыродзе. Палоскі памылак прадстаўляюць стандартныя памылкі сярэдняга значэння. Перасячэнне дзвюх чырвоных гарызантальных ліній з графікам (смяротнасць 90% і 98% адпаведна) паказвае акно смяротнасці, у якім можа развіцца рэзістэнтнасць.[25]
Сярэдняя смяротнасць нашчадкаў F1 дзікага P. argentipes. Палоскі памылак прадстаўляюць стандартныя памылкі сярэдняга значэння. Крывыя, перасяканыя дзвюма чырвонымі гарызантальнымі лініямі (смяротнасць 90% і 98% адпаведна), прадстаўляюць дыяпазон смяротнасці, пры якім можа развіцца рэзістэнтнасць [25].
Камары ў кантрольнай/не-IRS вёсцы (Маніфулкаха) аказаліся вельмі адчувальнымі да інсектыцыдаў. Сярэдняя смяротнасць (±SE) дзіка злоўленых камароў праз 24 гадзіны пасля збіцця і ўздзеяння склала 99,47 ± 0,52% і 98,93 ± 0,65% адпаведна, а сярэдняя смяротнасць нашчадкаў F1 склала 98,89 ± 1,11% і 98,33 ± 1,11% адпаведна (табліцы 2, 3).
Вынікі гэтага даследавання паказваюць, што серабрыстаногія пясчаныя мухі могуць развіць устойлівасць да сінтэтычнага пірэтроіду (SP) α-цыперметрыну ў вёсках, дзе пірэтроід (SP) α-цыперметрын рэгулярна выкарыстоўваўся. Наадварот, серабрыстаногія пясчаныя мухі, сабраныя ў вёсках, якія не ахоплены праграмай кантролю/палітычнай службы ЗША, аказаліся вельмі ўспрымальнымі. Маніторынг успрымальнасці папуляцый дзікіх пясчаных мух важны для кантролю эфектыўнасці выкарыстоўваных інсектыцыдаў, паколькі гэтая інфармацыя можа дапамагчы ў барацьбе з устойлівасцю да інсектыцыдаў. Высокі ўзровень устойлівасці да ДДТ рэгулярна паведамляецца ў пясчаных мух з эндэмічных раёнаў Біхара з-за гістарычнага селекцыйнага ціску з боку Палітычнай службы ЗША пры выкарыстанні гэтага інсектыцыду [1].
Мы выявілі, што P. argentipes вельмі адчувальная да пірэтроідаў, і палявыя выпрабаванні ў Індыі, Бангладэш і Непале паказалі, што IRS мае высокую энтамалагічную эфектыўнасць пры выкарыстанні ў спалучэнні з цыперметрынам або дэльтаметрынам [19, 26, 27, 28, 29]. Нядаўна Рой і інш. [18] паведамілі, што P. argentipes развіла ўстойлівасць да пірэтроідаў у Непале. Наша даследаванне палявой успрымальнасці паказала, што серабрыстаногія пясчаныя мушкі, сабраныя ў вёсках, якія не падвяргаліся ўздзеянню IRS, былі вельмі адчувальныя, але мухі, сабраныя ў вёсках з перыядычным/былым і пастаянным уздзеяннем IRS (смяротнасць вагалася ад 90% да 97%, за выключэннем пясчаных мух з Анандпур-Харуні, у якіх смяротнасць складала 89,34% праз 24 гадзіны пасля ўздзеяння), верагодна, былі ўстойлівыя да высокаэфектыўнага цыперметрыну [25]. Адной з магчымых прычын развіцця гэтай рэзістэнтнасці з'яўляецца ціск, які аказваюць руцінныя апырскванні ў памяшканнях (IRS) і лакальныя праграмы апырсквання на аснове выпадкаў, якія з'яўляюцца стандартнымі працэдурамі для барацьбы са ўспышкамі кала-азар у эндэмічных раёнах/кварталах/вёсках (Стандартная аперацыйная працэдура расследавання і кіравання ўспышкамі [30]. Вынікі гэтага даследавання даюць раннія прыкметы развіцця селектыўнага ціску супраць высокаэфектыўнага цыперметрыну. На жаль, гістарычныя дадзеныя аб успрымальнасці для гэтага рэгіёна, атрыманыя з дапамогай біялагічнага аналізу CDC, недаступныя для параўнання; ва ўсіх папярэдніх даследаваннях успрымальнасць P. argentipes кантралявалася з выкарыстаннем паперы, прасякнутай інсектыцыдамі СААЗ. Дыягнастычныя дозы інсектыцыдаў у тэставых палосках СААЗ з'яўляюцца рэкамендаванымі ідэнтыфікацыйнымі канцэнтрацыямі інсектыцыдаў для выкарыстання супраць пераносчыкаў малярыі (Anopheles gambiae), і аперацыйная прыдатнасць гэтых канцэнтрацый да пясчаных мух незразумелая, паколькі пясчаныя мухі лётаюць радзей, чым камары, і праводзяць больш часу ў кантакце з субстратам у біялагічным аналізе [23].
Сінтэтычныя пірэтроіды выкарыстоўваюцца ў эндэмічных па віруснай лішаі раёнах Непала з 1992 года, чаргуючы іх з спецыфічнымі рэчывамі альфа-цыперметрын і лямбда-цыгалотрынам для барацьбы з пясчанымі мухамі [31], а дэльтаметрын таксама выкарыстоўваецца ў Бангладэш з 2012 года [32]. Фенатыпічная рэзістэнтнасць была выяўлена ў дзікіх папуляцыях сярэбраных ног пясчаных мух у раёнах, дзе сінтэтычныя пірэтроіды выкарыстоўваліся на працягу доўгага часу [18, 33, 34]. Несінанімная мутацыя (L1014F) была выяўлена ў дзікіх папуляцыях індыйскай пясчанай мухі і была звязана з рэзістэнтнасцю да ДДТ, што сведчыць аб тым, што рэзістэнтнасць да пірэтроідаў узнікае на малекулярным узроўні, паколькі як ДДТ, так і пірэтроід (альфа-цыперметрын) нацэлены на адзін і той жа ген у нервовай сістэме насякомых [17, 34]. Такім чынам, сістэматычная ацэнка адчувальнасці да цыперметрыну і маніторынг рэзістэнтнасці камароў маюць важнае значэнне падчас перыядаў ліквідацыі і пасля ліквідацыі.
Патэнцыйным абмежаваннем гэтага даследавання з'яўляецца тое, што для вымярэння ўспрымальнасці мы выкарыстоўвалі біялагічны аналіз CDC у флаконах, але ва ўсіх параўнаннях выкарыстоўваліся вынікі папярэдніх даследаванняў з выкарыстаннем набору для біялагічных аналізаў СААЗ. Вынікі двух біялагічных аналізаў могуць быць непараўнальнымі, паколькі біялагічны аналіз CDC у флаконах вымярае накдаўн у канцы дыягнастычнага перыяду, тады як біялагічны аналіз набору СААЗ вымярае смяротнасць праз 24 або 72 гадзіны пасля ўздзеяння (апошняе для павольна дзеючых рэчываў) [35]. Яшчэ адным патэнцыйным абмежаваннем з'яўляецца колькасць вёсак IRS у гэтым даследаванні ў параўнанні з адной вёскай, якая не належыць да IRS, і адной вёскай, якая не належыць да IRS/былая IRS. Мы не можам меркаваць, што ўзровень успрымальнасці камароў-пераносчыкаў, які назіраецца ў асобных вёсках аднаго раёна, з'яўляецца рэпрэзентатыўным для ўзроўню ўспрымальнасці ў іншых вёсках і раёнах Біхара. Паколькі Індыя ўступае ў пост-элімінацыйную фазу віруса лейкеміі, вельмі важна прадухіліць значнае развіццё рэзістэнтнасці. Патрабуецца хуткі маніторынг рэзістэнтнасці ў папуляцыях мошак з розных раёнаў, кварталаў і геаграфічных абласцей. Дадзеныя, прадстаўленыя ў гэтым даследаванні, з'яўляюцца папярэднімі і павінны быць правераны шляхам параўнання з ідэнтыфікацыйнымі канцэнтрацыямі, апублікаванымі Сусветнай арганізацыяй аховы здароўя [35], каб атрымаць больш дакладнае ўяўленне аб стане ўспрымальнасці P. argentipes у гэтых раёнах, перш чым мадыфікаваць праграмы барацьбы з пераносчыкамі для падтрымання нізкай папуляцыі мошак і падтрымкі ліквідацыі віруса лейкеміі.
Камар P. argentipes, пераносчык віруса лейкозу, можа пачаць праяўляць раннія прыкметы ўстойлівасці да высокаэфектыўнага цыперметрыну. Рэгулярны маніторынг устойлівасці да інсектыцыдаў у дзікіх папуляцыях P. argentipes неабходны для падтрымання эпідэміялагічнага ўздзеяння мер па барацьбе з пераносчыкамі. Ратацыя інсектыцыдаў з рознымі механізмамі дзеяння і/або ацэнка і рэгістрацыя новых інсектыцыдаў неабходная і рэкамендуецца для барацьбы з устойлівасцю да інсектыцыдаў і падтрымкі ліквідацыі віруса лейкозу ў Індыі.
Час публікацыі: 17 лютага 2025 г.